-
血清沉淀是否會(huì )影響細胞生長(cháng)?如何避免?
發(fā)布時(shí)間: 2021-08-18 點(diǎn)擊次數: 1227次血清是細胞培養試劑中最基礎普遍的試劑之一,之前我們已經(jīng)介紹過(guò)了有關(guān)特殊加工工藝血清的一些小知識(了解和認識胎牛血清,特殊加工工藝血清,您知道幾種?),那么今天我們將繼續了解有關(guān)血清沉淀與血清熱滅活的相關(guān)知識~
血清沉淀是否會(huì )影響細胞生長(cháng)?如何避免?
血清沉淀
1. 血清沉淀是什么? 血清中經(jīng)常會(huì )出現肉眼可見(jiàn)的沉淀,其成分有多種類(lèi)型,產(chǎn)生的原因有很多。主要有纖維蛋白(絮狀沉淀)、甲胎蛋白、脂蛋白、冷凝集素、玻粘連蛋白、磷酸鈣(顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀)、膽固醇等。
●纖維蛋白(Fibrin)
血清中肉眼可見(jiàn)的沉淀物大多屬于這一類(lèi)型。由于在生產(chǎn)過(guò)程中,血清采集、過(guò)濾(3 次 0.1μm過(guò)濾)和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時(shí)血清中纖維蛋白原(Fibrinogen)處于溶解狀態(tài)。但在解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會(huì )發(fā)生凝集,形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。
▲ 纖維蛋白沉淀圖
●磷酸鈣(Calcium Phosphate)
這是一種常見(jiàn)的沉淀成分,通常會(huì )造成血清出現云霧狀渾濁。當血清在 37℃保存時(shí),這種現象尤其明顯,在倒置顯微鏡下可觀(guān)察到小黑點(diǎn)的存在。這些小黑點(diǎn)在布朗運動(dòng)的作用下四處游動(dòng),常被誤認為是微生物污染。
●其他成分(Other)
血清中的其他成分也會(huì )形成沉淀,例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等。
2. 沉淀是如何形成的?
造成沉淀的主要原因是溫度的改變、熱滅活、反復凍融、長(cháng)期儲存于2-8℃或者室溫。
3. 血清沉淀會(huì )影響細胞培養嗎?
我們在出廠(chǎng)前都會(huì )對血清進(jìn)行一系列質(zhì)檢測試,確保血清質(zhì)量達到嚴格標準。血清測試和細胞培養經(jīng)驗也表明,其沉淀成分不會(huì )影響血清作為細胞培養添加物的表現。這一點(diǎn)得到了眾多用戶(hù)和其他血清供應商的肯定。解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會(huì )發(fā)生凝集,形成肉眼可見(jiàn)的沉淀。
磷酸鈣顆粒經(jīng)常會(huì )被當成微生物污染而引發(fā)不必要的擔憂(yōu)。一般情況下,當操作人員融化血清后注意到有霧狀渾濁時(shí),常將其存放在 4℃冰箱中觀(guān)察,并考慮接下來(lái)是否繼續使用。但這樣會(huì )使沉淀進(jìn)一步增多,反而會(huì )使血清更加渾濁,進(jìn)而誤以為存在血清污染。并且,在倒置顯微鏡下,可在血清中觀(guān)察到小黑點(diǎn)(磷酸鈣顆粒的布朗運動(dòng)),更容易使人誤以為存在微生物污染。
為防止這類(lèi)誤解的產(chǎn)生,我們不建議用戶(hù)培養血清來(lái)驗證是否存在污染,而是將血清直接接種在細菌培養基上進(jìn)行培養,以觀(guān)察是否有細菌的增殖。并且,進(jìn)行革蘭氏染色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀(guān)察可直接確認是否存在微生物污染。
Zeta Life血清經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾除菌,低內毒素,通過(guò)血紅蛋白測試合格,經(jīng)美國農業(yè)部(USDA)認證。
4. 如何避免血清沉淀 ●正確解凍
首先,應按照逐步解凍的方式正確解凍血清:從-20℃取出后,置于4℃冰箱緩慢解凍,最后置于室溫完成解凍。如果直接從-20℃拿到室溫或37℃水浴解凍,則非常容易產(chǎn)生沉淀。在解凍過(guò)程中,請注意,應時(shí)不時(shí)緩慢搖晃血清瓶,可減少沉淀的產(chǎn)生。為避免反復凍融,建議您將血清分裝使用。
●使用和保存注意事項
血清沉淀很難預測和避免,出現沉淀后也無(wú)需擔憂(yōu),這并不會(huì )影響血清的品質(zhì)。已知血清沉淀在以下條件下會(huì )有增多的可能:
1) 熱滅活;
2) 37℃培養;
3) 反復凍融;
4) 伽馬射線(xiàn)照射;
5) 2-8℃長(cháng)期保存;
6) 長(cháng)期保存于可自動(dòng)化霜的冰箱中(溫度不穩定);
●血清沉淀的形成機理多種多樣,具體的機理尚不十分明確。我們尚不能準確預測和控制血清沉淀的產(chǎn)生。目前市面上所有品牌的血清產(chǎn)品都存在沉淀現象,這一點(diǎn)可以在各品牌網(wǎng)站上關(guān)于沉淀問(wèn)題的聲明上得到證實(shí)。
5. 有沉淀時(shí)如何處理?
我們建議您采用2000rpm離心5分鐘,取上清使用就好,比過(guò)濾方便,不需要另外準備濾芯和針筒,且不容易污染。
總結建議
血清產(chǎn)品中出現沉淀屬于正?,F象,不會(huì )影響到血清的品質(zhì),對細胞培養也不會(huì )產(chǎn)生影響,大家可以放心使用,若不立即使用,血清應保存在-20℃以下。
“為細胞而生"回饋活動(dòng)
Zeta Life胎牛血清現貨活動(dòng)*啦!安倍生物提供一系列Zeta Life胎牛血清,現在買(mǎi)就送?。?!即日起至8月22日參與活動(dòng)購買(mǎi)Zeta Life胎牛血清即可得華為Mate 40旗艦手機和Lola Rose 英國時(shí)尚防水石英女士手表或迪奧Dior口紅4支套裝,多買(mǎi)多送哦!
活動(dòng)一:
選購任意單品即可送華為Mate 40 5G全網(wǎng)通手機(8G+128G)
產(chǎn)品名稱(chēng)
貨號
規格
胎牛血清-澳洲血源
Z7010FBS-500
500ml*5
胎牛血清-法國血源
Z7186FBS-500
500ml*30
胎牛血清-墨西哥血源
Z7187FBS-500
500ml*30
活動(dòng)二:
選購任意單品即可送Lola Rose 英國時(shí)尚防水石英女士手表或迪奧Dior口紅4支套裝(二選一)
產(chǎn)品名稱(chēng)
貨號
規格
胎牛血清-澳洲血源
Z7010FBS-500
500ml*1
胎牛血清-法國血源
Z7186FBS-500
500ml*10
胎牛血清-墨西哥血源
Z7187FBS-500
500ml*10
安培生物,一個(gè)致力成為推動(dòng)生命科學(xué)進(jìn)步的值得信賴(lài)合作者。
-
血清系列
-
細胞轉染
-
細胞凍存
-
實(shí)驗耗材
-
分子試劑
-
細胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO(東洋紡)
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner(格瑞納)
-
IKA(艾卡)
-
化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測
-
細胞生物學(xué)
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細胞類(lèi)-實(shí)驗耗材
-
原代細胞
-
植物檢測系列試劑盒
-
SERANA
-
細胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測系列試劑盒(AKEN)
-
類(lèi)器官培養
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質(zhì)
-
細胞因子分子
-
生物樣本庫