收到細胞后，發(fā)現是培養瓶，第一次操作的束手無(wú)策，怎么辦？

 首先我們得弄明白我們得細胞是貼壁細胞還是懸浮細胞或者是半懸浮細胞,不明白的同學(xué)可以參考下圖哦：

   半懸浮半貼壁:

BV-2細胞

貼壁細胞：HCMEC/D3

   懸浮細胞：

THP-1

 

貼壁細胞請遵守以下準則：

細胞收到后，顯微鏡下觀(guān)察，有些細胞貼壁比較牢，它不會(huì )因為運輸問(wèn)題有變化，收到后下顯微鏡下觀(guān)察細胞的密度，確定無(wú)污染，細胞無(wú)異常先放培養箱穩定1-2個(gè)小時(shí)后，按照貼壁細胞消化順序消化：

一

貼壁細胞消化順序如下：

1.準備工作，胰酶、培養基、PBS各預熱10-15分鐘
1. 去上清，先用PBS清洗兩次

2.棄PBS后，加入1ml胰酶，前后左右輕輕搖勻后，超凈臺常溫放置3-5分鐘左右

3.顯微鏡下觀(guān)察細胞，若細胞變得橢圓透亮后，輕拍細胞瓶壁

4.顯微鏡下觀(guān)察細胞是否已經(jīng)脫落，要是沒(méi)有脫落繼續消化2分鐘后再輕輕拍打，95%以上細胞脫落請立即加入含有血清的培養基終止消化

5.將消化下來(lái)的細胞懸液移入離心管離心，正常離心轉速：1000-1200轉，5分鐘

6.分瓶，第一次傳代建議1：2傳，或者傳代一瓶，凍存一支

二

懸浮細胞傳代規則：

1，收到細胞后穩定一小時(shí)后，分兩個(gè)50ml的離心管對等離心1000轉5分鐘

2.棄上清，一管分2個(gè)T25瓶傳代，一管凍存

懸浮細胞傳代不需要每次都離心操作，建議每傳代2次離心操作一次，以去除細胞中的碎片

三

半懸浮半貼壁細胞消化要領(lǐng)：

1.收到細胞穩定一小時(shí)后，懸浮細胞收集離心，貼壁細胞按照貼壁順序來(lái)消化即可

溫馨提示：

收到細胞請一定要仔細閱讀說(shuō)明書(shū)，按照傳代步驟操作，請保持和商家一樣的培養方式，比如說(shuō)，牛是吃草的，你想改善它的營(yíng)養，也只能把草的質(zhì)量提高，千萬(wàn)不能換成肉啊 ，不只貴還會(huì )把牛餓死。

以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉染、大規模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶(hù)，提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑；inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細胞培養規模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。