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原位裂解細胞的CAT分析法
發(fā)布時(shí)間: 2021-12-15 點(diǎn)擊次數: 1034次材料與儀器
轉染細胞
Triton裂解液
培養皿 培養箱步驟
1. 60 mm 培養皿中轉染了CAT表達質(zhì)粒的細胞,用2 ml PBS洗1次。每培養皿加入2 ml 低滲緩沖液,在室溫下溫育2~5 min。
2. 吸去低滲緩沖液,加入400 μl Triton裂解液。用橡膠刮子將細胞刮離培養血,用1 000 μl 移液器將裂解物移入1.5 ml 微量離心管中。
3. 微量離心1 min 除去細胞核,不可溶性蛋白。將上清轉入一個(gè)干凈的微量離心管中, 進(jìn)行CAT活性分析。同實(shí)驗其他方法
CAT活性的層析分析法
1. 100 mm 培養皿中的轉染了CAT表達質(zhì)粒的貼壁細胞,用PBS洗兩次,每次5 ml每培養皿加入1 ml TEN溶液。將細胞置于冰浴5 min。 2. 用橡膠
CAT活性的相-抽提分析法
一、來(lái)源于哺乳動(dòng)物細胞 1. 按“CAT活性的層析分析法"中的步驟1~5的凍融法,制備哺乳動(dòng)物細胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制細胞方法來(lái)收集細胞,則將原位裂解法的步驟1至4用以下的步驟2
人生長(cháng)激素的放射免疫分析法
1. 取轉染了hGH表達質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物細胞的培養液100~500 μl。 2. 加100 μl 培養液或標準品至12 mm×75 mm 圓底試管中。加入100 μl 125I-
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安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉染、大規模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶(hù),提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn),包括培養間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細胞培養規模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。
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