www.zgyzbh.com-国产精品乱码一区二区三区,乱色老熟女一区二区三区,亚洲小说春色综合另类,S货C货大声点叫

銷(xiāo)售熱線(xiàn)

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > BV2細胞異常生長(cháng)形態(tài)解析及解決方案

    BV2細胞異常生長(cháng)形態(tài)解析及解決方案

    發(fā)布時(shí)間: 2022-01-06  點(diǎn)擊次數: 3556次

    BV2

    常用的小膠質(zhì)細胞模型,它用攜帶v-raf/v-myc基因的逆轉錄病毒(J2)感染原代小膠質(zhì)細胞而獲得永生化。BV2細胞表達非特異性酯酶活性,它具有吞噬性能力,并缺乏過(guò)氧化物酶活性。這種細胞不僅會(huì )分泌溶菌酶,在適當的刺激下,還會(huì )分泌白細胞介素1和腫瘤壞死因子。


    此外,BV2細胞還表現出自發(fā)的抗念珠菌活性,用干擾素-Y處理后獲得殺腫瘤活性。



    從表型上看,BV2細胞對MAC1和MAC2抗原呈陽(yáng)性,而對MAC3、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)和半乳糖核苷(GC)抗原呈陰性[1]。

    圖片

    圖A. BV2細胞顯微照片,bar=30 μm.

    圖B. 通過(guò)掃描電鏡觀(guān)察,在玻璃蓋板上培養的BV2細胞,bar=5 μm.

    圖C. 通過(guò)透射電鏡觀(guān)察,BV2細胞的部分細胞質(zhì)吞噬iCA,bar=3 μm.

    (圖片引用自文獻[1]


    在培養BV2細胞的時(shí)候,同學(xué)們最常遇到的問(wèn)題就是生長(cháng)形態(tài)異常。生長(cháng)形態(tài)異常往往伴隨著(zhù)細胞生長(cháng)緩慢、細胞死亡等,導致實(shí)驗做不出結果,給大家帶來(lái)重重困擾。


    小普根據多年的實(shí)驗經(jīng)驗,為大家整理了這一現象可能發(fā)生的原因,及相應解決方案。


    首先我們來(lái)看看正常的BV2形態(tài)。結合眾多文獻和Procell的細胞圖片來(lái)看,BV2是一種半貼壁半懸浮細胞,它的形態(tài)并不規則,存在圓形和梭形兩種。


    懸浮細胞為圓形,貼壁細胞既有圓形也有梭形。由于圓形細胞折光率高,它的邊緣看起來(lái)是發(fā)亮的;梭形細胞則向兩端伸出黑色突起。

    圖片

    (圖片源自Procell)


    那么,異常生長(cháng)的BV2細胞有哪些形態(tài)呢?


    如何根據不同的異常生長(cháng)形態(tài),調整改善培養條件,及時(shí)解決問(wèn)題?


    小普總結如下:


    圖片

    形態(tài)1:細胞全部飄起,*不貼壁

    解析:分為培養基偏堿及復蘇后不貼壁兩種情況。

    (1)培養基偏堿。培養瓶不透氣或者開(kāi)封時(shí)間過(guò)長(cháng),培養基PH將增大,可見(jiàn)培養基呈紫紅色。BV2對培養基酸堿度較為敏感,在偏堿培養基中培養數小時(shí)后將會(huì )全部飄起。

    解決方案:給細胞上新鮮配制的培養基,并使用透氣瓶。

    (2)復蘇后不貼壁。需要檢查凍存或復蘇操作過(guò)程,以及培養基是否存在問(wèn)題。

    解決方案:確保凍存前狀態(tài)良好及凍存復蘇操作規范,使用新鮮配制的培養基,即可解決問(wèn)題。


    圖片

    形態(tài)2:細胞形態(tài)變?yōu)榘⒚装蜆?/strong>

    解析:小膠質(zhì)細胞是一種可塑性*的細胞,可通過(guò)特定因素激活,從而發(fā)揮其免疫功能。從靜息態(tài)變?yōu)榧せ顟B(tài)的過(guò)程中,小膠質(zhì)細胞形態(tài)也隨之發(fā)生改變。


    實(shí)驗中常用細菌脂多糖(LPS)和干擾素-γ(IFNγ),分別模擬細菌和病毒感染,來(lái)刺激小膠質(zhì)細胞激活。受到刺激的小膠質(zhì)細胞突起縮短變厚,胞體增大,呈現阿米巴樣(如下圖所示)。


    但有的時(shí)候BV2形態(tài)變化并不明顯,還需要結合其他實(shí)驗,如檢測NO、IL-13等炎癥因子的表達,來(lái)確定BV2是否被定向激活。

    圖片

    (圖片引用自文獻[2]


    如果細胞沒(méi)有受到任何刺激,就已經(jīng)呈現阿米巴樣,或者受刺激后,炎癥因子表達沒(méi)有差異,那么細胞有可能發(fā)生了自分化。


    其原因可以從以下幾點(diǎn)考慮:

    (1)存在潛在微生物污染,刺激細胞自分化。

    解決方案:通過(guò)去掉培養基中的抗生素確定污染類(lèi)型,并排查污染源頭。

    (2)使用的胎牛血清內毒素高,內毒素刺激細胞自分化。

    解決方案:嘗試使用超低內毒素胎牛血清,或許能得到改善。


    圖片

    形態(tài)3:全都是分枝狀細胞,圓形細胞少

    解析:這種形態(tài)往往伴隨著(zhù)細胞生長(cháng)慢或生長(cháng)停滯的情況。由于圓形細胞增殖速度較快,在圓形細胞缺失的狀況下,整體增殖速度就會(huì )減慢。

    解決方案:由于BV2是一種半貼壁半懸浮細胞,貼壁和懸浮細胞的比例并不固定,當懸浮細胞較多時(shí),換液和傳代時(shí)要將懸浮細胞收集,避免圓形細胞的大量損失。


    總而言之,BV2細胞的形態(tài)、生長(cháng)狀態(tài)與其生長(cháng)環(huán)境息息相關(guān),給細胞以最合適的環(huán)境,嚴格按照要求規范操作,細胞也將用好的狀態(tài)回報你。


    參考文獻:

    [1] PubMed=2110186; DOI=10.1016/0165-5728(90)90073-V.

    Blasi E., Barluzzi R., Bocchini V., Mazzolla R., Bistoni F.

    Immortalization of murine microglial cells by a v-raf/v-myc carrying retrovirus.

    J. Neuroimmunol. 27:229-237(1990)

    [2] PMID=31590042 ; DOI=10.1016/j.molimm.2019.09.020.

    Zhang J, Zheng Y, Luo Y, Du Y, Zhang X, Fu J.

    Curcumin inhibits LPS-induced neuroinflammation by promoting microglial M2 polarization via TREM2/ TLR4/ NF-κB pathways in BV2 cells. 



    以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉染、大規模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶(hù),提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn),包括培養間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細胞培養規模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。


產(chǎn)品中心 Products
陆川县| 兴海县| 砀山县| 永靖县| 吴忠市| 新密市| 区。| 泗阳县| 墨玉县| 泉州市| 普兰县| 寿阳县| 二连浩特市| 林州市| 邵阳县| 舒城县| 全椒县| 苏州市| 太仆寺旗| 收藏| 晋宁县| 邵阳市| 榆树市| 开平市| 怀安县| 贵溪市| 清水县| 长岭县| 云林县| 昔阳县| 宜昌市| 苍梧县| 全州县| 曲麻莱县| 乐都县| 乃东县| 淅川县| 石楼县| 渝中区| 杭州市| 武冈市|