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    如何提高腫瘤細胞培養存活率和生長(cháng)率?

    發(fā)布時(shí)間: 2022-10-20  點(diǎn)擊次數: 832次

    原理

    根據人們的經(jīng)驗,腫瘤細胞在體外不易培養,建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。

    當腫瘤組織或細胞初代接種培養后,常出現以下幾種情況:


    1.  *無(wú)細胞游出或移動(dòng);

    2.  有細胞移動(dòng)和游出,但無(wú)細胞增殖,細胞長(cháng)時(shí)間處于停滯狀態(tài)以致難以傳代;

    3.  有細胞增殖,傳若干代后停止生長(cháng)或衰退死亡;

    4.  傳數代后細胞增殖緩慢,經(jīng)過(guò)一段停滯期后,才又呈旺盛生長(cháng)狀態(tài),形成穩定生長(cháng)的腫瘤傳代細胞系。

    以上現象說(shuō)明腫瘤細胞對體外生存條件有較高的要求,并需經(jīng)過(guò)對新環(huán)境的適應才能生長(cháng),因此欲獲得好的培養效果,不能局限于一般培養法,必須采用一些特殊的措施。


    材料與儀器

    瘤組織
    Hanks
    棉球

    步驟

    一、適宜底物


    如:把經(jīng)過(guò)純化的細胞接種在不同的底物上,如鼠尾膠原底層、飼細胞層等。

    二、生長(cháng)因子

    應用促細胞生長(cháng)因子,向培養液中增加一種或幾種促細胞生長(cháng)因子。根據細胞種類(lèi)不同選用不同的促生長(cháng)物,常用有胰島素、氫化可的松、雌激素以及其它生長(cháng)因子。

    三、動(dòng)物體媒介培養

    為提高腫瘤細胞對體外培養環(huán)境的適應力和增加有活力癌細胞(干細胞)的數量,可采用動(dòng)物體轉嫁接種成瘤后,再從動(dòng)物體內取出進(jìn)行培養,能提高體外培養的成功率。受體動(dòng)物以裸鼠最好。

    1.  瘤塊接種

    取新鮮瘤組織,用Hanks液洗凈血污,切成1~3 毫米小塊,用穿刺針頭吸一小瘤塊,用酒精棉球擦拭動(dòng)物腋部后,直接刺入皮下,注入瘤塊。

    2.  飼養觀(guān)察,待腫瘤生長(cháng)達較大體積后,剝取出瘤組織。

    3.  進(jìn)行體外培養。

    4.  為防止失敗,仍取部分瘤組織繼續在裸鼠體內傳代。通過(guò)裸鼠媒介接種,有活力的腫瘤細胞數量增多,細胞培養易于成功。
     
    腫瘤細胞培養方法與培養正常細胞*相同,但成功率比正常細胞高。


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