久久热这里只有精品_葉綠體的分離與熒光觀(guān)察-深圳市安培生物科技有限公司

技術(shù)文章ARTICLE

您當前的位置：首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 葉綠體的分離與熒光觀(guān)察

葉綠體的分離與熒光觀(guān)察

發(fā)布時(shí)間： 2023-01-29　　點(diǎn)擊次數： 905次

原理
組織勻漿后懸浮在等滲介質(zhì)中進(jìn)行差速離心，是分離細胞器的常用方法。一個(gè)顆粒在離心場(chǎng)中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀、密度、離心力及介質(zhì)黏度等。同一離心場(chǎng)中，同一時(shí)間內，密度和大小不同的顆粒沉降速率不同。依次增加離心力和離心時(shí)間，就能使非均一的懸浮液中的顆粒按其大小、密度先后分批沉降在離心管底部，從而可分批收集各種亞細胞成分。
材料與儀器
新鮮菠菜
氯化鈉
離心機組織搗碎機顯微鏡天平離心管紗布燒杯量筒滴管載玻片、蓋玻片
步驟
一、實(shí)驗步驟

1. 選取新鮮的嫩菠菜葉，洗凈擦干后去除葉梗及粗脈，稱(chēng)30 g 于150 ml 0.35 mol/L NaCI溶液中，裝入組織搗碎機。

2. 利用組織搗碎機低速（5 000 r/min）勻漿3~5 min。

3. 將勻漿用6層紗布過(guò)濾于500 ml 燒杯中。

4. 取濾液4 ml 在1 000 r/min 下離心2 min。棄去沉淀。

5. 將上沾液在3 000 r/min下離心5 min。棄去上清液，沉淀即為葉綠體（混有部分細胞陔）。

6. 將沉淀用0.35 mol/L NaCI溶液懸浮。

7. 取葉綠體懸液一消滴于載片上，加蓋片后即可在普通光鏡和熒光顯微鏡下觀(guān)察。

（1）在普通光鏡下觀(guān)察。

（2）在熒光顯微鏡下觀(guān)察。

（3）取葉綠體懸液一滴滴在無(wú)熒光載片上，再漓加一滴0.01%吖啶橙熒光染料，加無(wú)熒光蓋片后即可以熒光顯微鏡下觀(guān)察。

菠菜葉手切片觀(guān)察用剖須刀將新鮮的嫩菠菜切削一斜面置于載片上，滴加1~2滴0.35 mol/L NaCI溶液，加蓋片后輕壓，置顯微鏡下觀(guān)察。

（1）在普通光鏡下觀(guān)察。

（2）在熒光顯微鏡下觀(guān)察。

（3）用同樣方法制片，但滴加1~2滴0.01%吖啶橙染液染色1 min，洗去余液，加蓋廾后即町以熒光顯微鏡下觀(guān)察。

二、實(shí)驗結果

1. 葉綠體的分離和觀(guān)察

（1）普通光鏡下，可看到葉綠體為綠色橄欖形，在高倍鏡下可看到葉綠體內部含有較深的綠色小顆粒，即基粒。

（2）以Olympus熒光顯微鏡為例，在選用B(blue)激發(fā)濾片，B雙色鏡和O530（orange）阻斷濾片的條件下，葉綠體發(fā)出火紅色熒光。

（3）加入吖啶橙染色后，葉綠體可發(fā)出桔紅色熒光，而其中混有的細胞核則發(fā)綠色熒色。

2. 菠菜葉手切片觀(guān)察

（1）在普通光鏡下可以看到三種細胞

①表面細胞：為邊緣呈鋸齒形的鱗片狀細胞。

②保衛細胞：為構成氣孔的成對存在的腎形細胞。

③葉肉細胞：為排成柵狀的長(cháng)方形和橢幽形細胞。

葉綠體呈綠色橄欖形，在高倍鏡下還可以看到綠色的基粒。

（2）在熒光顯微鏡下，葉綠體發(fā)出火紅色熒光，但其熒光強度要比游離葉綠體弱。氣孔發(fā)綠色熒光，兩保衛細胞內的火紅色葉綠體則環(huán)繞氣孔排列成一圈。表皮細胞內葉綠體數量要比葉肉細胞少。

（3）用吖啶橙染色后，葉綠體則發(fā)出枯紅色熒光，細胞核町發(fā)出綠色熒光，氣孔仍為綠色。

以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉染、大規模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶(hù)，提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑；inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細胞培養規模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。

下一篇：植物細胞分裂和植物分生組織

上一篇：植物原生質(zhì)體的制備

產(chǎn)品中心 Products

www.zgyzbh.com-国产精品乱码一区二区三区,乱色老熟女一区二区三区,亚洲小说春色综合另类,S货C货大声点叫

葉綠體的分離與熒光觀(guān)察