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    細胞培養時(shí)的三個(gè)常見(jiàn)小問(wèn)題

    發(fā)布時(shí)間: 2024-01-18  點(diǎn)擊次數: 364次

    三個(gè)常見(jiàn)小問(wèn)題:

    細胞培養用的培養基是不是必須加雙抗?血清在使用之前是不是一定要滅活?往培養基里加細胞因子又是什么操作?


    要不要加雙抗?

    在培養基中添加抗生素是一種常見(jiàn)的操作,其主要作用是抑制或殺死培養物中的某些細菌或真菌,從而避免它們對目標細胞的干擾和污染。

    在培養實(shí)驗中,選擇適當濃度和種類(lèi)的抗生素,可以有效地消除或減少雜菌、污染菌或其他不需要的微生物,保證培養物的純度和穩定性。

    同時(shí),添加抗生素還可以用來(lái)篩選或檢測耐藥性菌株,評估其對抗生素的敏感性和耐受性。

    但是,添加抗生素并不能確保你的細胞一定不被微生物污染,因操作不當造成污染的還是會(huì )被污染的。

    并且,一旦細胞被污染,抗生素也只能起到一定的抑制延緩作用,并不能全部殺滅微生物。而且,長(cháng)期添加抗生素的話(huà),還容易掩蓋培養環(huán)境的真實(shí)情況。

    因此 ,雖然在培養基中添加抗生素是常見(jiàn)操作,但并不是必須操作。


    細胞因子是什么?

    除了抗生素外,培養基中還可以添加細胞因子,以模擬體內環(huán)境和調節細胞功能。

    細胞因子是一類(lèi)多肽分子或蛋白質(zhì),由細胞自身或其他細胞產(chǎn)生,并通過(guò)受體介導的信號轉導途徑影響目標細胞的增殖、分化、存活、遷移等過(guò)程。

    在細胞培養中,添加適當濃度和種類(lèi)的細胞因子,可以促進(jìn)細胞增殖和分化,提高細胞存活率和功能表現。

    例如,添加表皮生長(cháng)因子(EGF)可以促進(jìn)表皮細胞增殖和修復;添加肝細胞生長(cháng)因子(HGF)可以促進(jìn)肝細胞增殖和再生;添加白細胞介素-2(IL-2)可以促進(jìn)T淋巴細胞增殖和活化等。

    此外,添加某些細胞因子還可以誘導干細胞分化為特定類(lèi)型的成體細胞,如添加神經(jīng)營(yíng)養因子(NGF)可以誘導干細胞分化為神經(jīng)元。


    血清要滅活才能用?

    血清中含有生長(cháng)因子可促進(jìn)細胞繁殖,含有附著(zhù)因子可促進(jìn)細胞貼壁,同時(shí)還有一種特殊的活性能抵抗胰蛋白酶的消化作用。

    血清內含有豐富的礦物質(zhì)、酯類(lèi)和激素。最常見(jiàn)的血清包括:小牛血清、胎牛血清、成年馬血清等。其中胎牛血清對培養要求高的細胞系。

    血清來(lái)源于動(dòng)物, 因此必定存在批次間的差異,且生產(chǎn)過(guò)程中由于工藝流程的不同,哪怕是同一類(lèi)型的血清也會(huì )存在質(zhì)量上的巨大差異。

    血清的滅活是將血清置于56攝氏度中30分鐘,然后再分裝成數份保存于-20攝氏度。

    血清加熱的最初目的是為了免疫分析時(shí)用于滅活補體的,因此就有了血清使用前要滅活的說(shuō)法。

    但現在商業(yè)化的血清產(chǎn)品,基本上出廠(chǎng)之前都經(jīng)過(guò)了滅活處理,所以一般情況下,就不需要再操作一次滅活了,除非供應商在銷(xiāo)售時(shí)特別強調了要進(jìn)行這個(gè)操作。


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