細胞培養過(guò)程中常見(jiàn)的可造成污染的微生物包括細菌、真菌、支原體、酵母等，不論是哪種污染，均會(huì )造成細胞生長(cháng)變慢、培養基渾濁、細胞變形等不利于細胞生長(cháng)的現象，更有甚者可能會(huì )出現污染同細胞箱內別的細胞的現象，因此，細胞培養過(guò)程中應樹(shù)立嚴格的無(wú)菌意識，盡量避免造成細胞污染。

準備處理細胞前，有如下幾點(diǎn)注意事項：

1. 細胞培養應在細胞房?jì)冗M(jìn)行，同時(shí)細胞房應保證環(huán)境狀況良好，空氣干燥。

   
   

2. 進(jìn)入細胞房前應在緩沖間穿戴細胞房專(zhuān)用隔離衣、專(zhuān)用拖鞋，戴好一次性口罩及手套。

3.細胞房應配置75%酒精噴壺，打開(kāi)細胞培養箱前應使用75%酒精全面消毒雙手，同時(shí)對細胞培養箱外側進(jìn)行消毒。

4.細胞操作過(guò)程中所使用的耗材如槍頭、Ep管、凍存管、離心管等均要求無(wú)菌，使用到的儀器如離心機、移液器、水浴鍋等均為細胞房專(zhuān)用儀器。

5.處理細胞等一系列操作均應在生物安全柜內進(jìn)行。

6.細胞培養箱內應加入硫酸銅溶液，防止細胞污染，同時(shí)，每天處理細胞的同時(shí)注意觀(guān)察CO2罐的容量，若不足及時(shí)更換。

開(kāi)始處理細胞到結束的過(guò)程是細胞最容易出現污染的環(huán)節，因此需格外注意操作，注意事項如下：

1.開(kāi)始操作前，生物安全柜內放入需要的物品，開(kāi)啟紫外燈消毒30min。

2.消毒結束后，用75%酒精浸泡的棉球或紗布擦拭臺面，后面所有放入生物安全柜內的物品均需酒精噴灑消毒。

3.對于一般的細胞來(lái)說(shuō)，正常培養的過(guò)程中均應在培養基中按比例加入青霉素鏈霉素雙抗，防止細胞出現細菌污染。

4.在處理細胞的過(guò)程中，小心操作，移液器槍頭不能碰到生物安全柜內任何物品，若有碰到應及時(shí)更換，同時(shí)，吸取不同液體時(shí)注意及時(shí)更換槍頭，防止出現交叉污染。

5.所有培養基配置完成后建議分裝使用，每次實(shí)驗結束后剩余培養基、胰酶等均用封口膜進(jìn)行封口。

6.處理細胞完成后，使用75%酒精浸泡的紗布仔細擦拭臺面，最后開(kāi)啟紫外燈消毒。

7.在所有人結束細胞實(shí)驗后，細胞房?jì)葢獓栏裣?，?4消毒液或新潔爾滅稀釋后擦拭桌面，再用專(zhuān)用拖把拖地，最后開(kāi)啟紫外燈消毒。

細胞操作整個(gè)過(guò)程較為簡(jiǎn)單，但操作需要注意很多細節，細胞污染可能避無(wú)可避，一旦出現了細胞污染，建議盡早扔掉細胞并對培養箱進(jìn)行消毒。

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