1.相信很多小伙伴將質(zhì)粒電泳后發(fā)現，質(zhì)粒不是單一條帶，而是出現了很多條帶，例如下圖：

2.質(zhì)粒為什么出現這樣的情況？

一般理解來(lái)說(shuō)，質(zhì)粒DNA應如圖2（左）所示的簡(jiǎn)單環(huán)狀結構。然而，雙鏈環(huán)狀DNA的分子軸變形或雙螺旋的扭曲，導致閉合環(huán)狀DNA中每個(gè)螺旋轉彎的實(shí)際堿基對數量發(fā)生變化，或者導致螺旋軸發(fā)生規則的空間變形，產(chǎn)生拓撲結構，形成質(zhì)粒DNA的超螺旋性狀（圖2右）。

因此，不同的拓撲結構將使質(zhì)粒DNA形成多種形式，包括共價(jià)封閉圓形（CCC）形式、開(kāi)放圓形（OC）形式（也稱(chēng)為“缺口形式"）和線(xiàn)性形式（通常通過(guò)奇特的限制性消化獲得）。在CCC形式中，兩條DNA鏈是共價(jià)閉合的，DNA是超螺旋的。這種亞型的結構最緊密。如果DNA斷裂產(chǎn)生缺口，就會(huì )產(chǎn)生OC，卷曲也就消失了。當兩條線(xiàn)在同一位置斷裂時(shí)，就會(huì )產(chǎn)生線(xiàn)性形式。此外，質(zhì)?？赡芤怨丫垠w形式出現，例如串聯(lián)體，而串聯(lián)體又可能以不同的異構體形式存在。所有這些形式都可以通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳觀(guān)察到。但出現多少種條帶會(huì )根據你的質(zhì)粒提取技術(shù)、質(zhì)粒的新鮮程度、電泳液的配置以及瓊脂糖凝膠的配置等有所不同。

2.怎么區分質(zhì)粒的電泳條帶？

一般來(lái)說(shuō)，質(zhì)粒遷移速度由快到慢分別是共價(jià)封閉原形（超螺旋）形式、線(xiàn)性和開(kāi)放圓環(huán)（開(kāi)環(huán)）形式，并伴隨著(zhù)其他形式。原因是：電泳DNA遷移速率與分子大小和構象相關(guān)，分子構象越大，空間位阻阻力越大。超螺旋結構較為緊密，因此跑的快；開(kāi)環(huán)質(zhì)粒由于DNA斷開(kāi)，阻力增大，因此跑的最慢。

3.怎么驗證質(zhì)粒是否可用？

綜上所述，質(zhì)粒存在多少條帶與多種因素相關(guān)，沒(méi)有存在絕對的衡量標準。但如果用限制性?xún)惹忻赶|(zhì)粒DNA，只會(huì )出現一條清晰的條帶。并且，由于酶切形成線(xiàn)性化DNA片段，其電泳遷移速率會(huì )比對照組原始質(zhì)粒的超螺旋結構速度慢，可以檢驗質(zhì)粒是否被切開(kāi)。

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