Cre-ERT2小鼠是一類(lèi)含有雌激素受體的配體結合區突變體（ERT）與cre重組酶的融合蛋白表達的小鼠。Cre-ERT2在無(wú)Tamoxifen誘導的情況下，在細胞質(zhì)內處于無(wú)活性狀態(tài)；當Tamoxifen誘導后，Tamoxifen的代謝產(chǎn)物4-OHT（雌激素類(lèi)似物）與ERT結合，可使Cre-ERT2進(jìn)核發(fā)揮Cre重組酶活性。

Tamoxifen給藥建議如下：

3. 他莫昔芬的給藥方式

他莫昔芬可以通過(guò)腹腔注射、灌胃、飲食或飲水等途徑給藥，應用比較廣的是腹腔注射給藥，腹腔注射的給藥劑量精準，便于控制。

腹腔注射給藥流程：正確抓取小鼠，將小鼠的鼻子朝向地面，露出腹部；定位動(dòng)物的中線(xiàn)并將腹部分成四個(gè)象限，特別是動(dòng)物的右下象限，是腹腔注射的合適位置（右下象限缺少重要的解剖結構）；多次腹腔注射時(shí)，應交替注射部位。

注：Tamoxifen會(huì )影響胎兒發(fā)育和生產(chǎn)，孕鼠誘導的時(shí)間盡量選擇孕晚期，并同時(shí)注射孕酮來(lái)減少流產(chǎn)概率。

灌胃給藥的給藥劑量和頻率與腹腔注射相同，在正式實(shí)驗前，建議同學(xué)們先反復練習，熟練掌握灌胃給藥的技巧。

飲食/飲水給藥使用較少，主要是他莫昔芬水溶性差，小鼠的給藥劑量不好量化，且需要的誘導時(shí)間較長(cháng)（一般需要幾周進(jìn)行誘導），在誘導期間往往還伴隨著(zhù)小鼠體重的下降（約10-15%）。

4. 注意事項

A. 他莫昔芬注射完成后不建議立刻開(kāi)展實(shí)驗，一般來(lái)講，停藥后需要繼續飼養7天，再安排后續實(shí)驗。

B. 對照組小鼠需要同步進(jìn)行不含他莫昔芬的玉米油溶液給藥。

C. 未處理的小鼠需要和注射他莫昔芬的小鼠分籠飼養，小鼠舐舔到他莫昔芬懸液，梳毛等行為可能導致意外敲除。

D. 加熱不會(huì )導致Tamoxifen失效，37℃過(guò)夜溶解他莫昔芬是沒(méi)有問(wèn)題的。

最后，不同的實(shí)驗方案、不同的小鼠品系、不同的組織器官等對于給藥劑量、給藥頻率和給藥方式等的要求往往是不同的，因此，上述方法只是一個(gè)參考，面對具體實(shí)驗時(shí)，同學(xué)們還應根據參考文獻、實(shí)驗經(jīng)驗先進(jìn)行預實(shí)驗，以確定最佳方案。

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