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    進(jìn)口胎牛血清實(shí)驗時(shí)出現的黑點(diǎn)是怎么回事?

    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-04  點(diǎn)擊次數: 1143次
       進(jìn)口胎牛血清FBS是細胞培養中使用最多的生長(cháng)因子,因為它含有高水平的營(yíng)養,用于哺乳動(dòng)物細胞培養以生產(chǎn)抗體、抗原、干細胞和疫苗的含血清和血清減少培養基的配制。用于免疫測定和印跡的封閉劑,所有胎牛血清都是*可追溯的,并且來(lái)自經(jīng)過(guò)審核的供應商。在單獨容器中處理FBS,并對其進(jìn)行三次0.1μ無(wú)菌過(guò)濾,消除了任何交叉污染的可能性。
      胎牛血清細胞培養過(guò)程中一旦發(fā)現有黑點(diǎn)出現,首先要肉眼觀(guān)察培養基是否混濁;然后在鏡下觀(guān)察培養細胞生長(cháng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細胞被污染,微生物則會(huì )大量繁殖,培養基就會(huì )迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
      如果在鏡下觀(guān)察細胞,生長(cháng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現前相比,沒(méi)有任何變化,那么可能與以下幾種情況有關(guān):
      1.細胞生長(cháng)過(guò)老,破碎的細胞殘??;
      2.血清質(zhì)量不好,反復凍融的結果;
      3.配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長(cháng);
      4.配制培養基的水質(zhì)、容器不合格??蓱秒x心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);
      5.培養原代細胞中出現小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
      胎牛血清細胞培養中如何防止黑點(diǎn)出現:
      1.盡可能減少血清凍融次數;
      2.培養基無(wú)需37℃水??;
      3.培養基保持最佳PH值7.0-7.2;
      4.嚴格控制配制培養基的水質(zhì),容器定期刷洗;
      5.掌握細胞傳代的理想時(shí)機,細胞切勿生長(cháng)過(guò)老。
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