3D細胞培養基質(zhì)膠

一、產(chǎn)品優(yōu)勢

1、基質(zhì)膠為植物源：

A.無(wú)人畜共患病的病原菌或毒素污染

B.氨基酸序列100%人源化

C.成本低且易規?；罅可a(chǎn)

D.3D培養結束后基質(zhì)膠可以融化

E.4度運輸

F.產(chǎn)品有效期2年

2、可用作醫療生物原料：

A.高安全、低過(guò)敏

B.高活性、高純度

C.最是適合人體研究

3、符合人體癌藥篩檢：

A.低成本且穩定

B.3D癌組織培養系統

C.可用于精準人體癌藥篩檢

4、滿(mǎn)足生物原料需求：

A.自產(chǎn)關(guān)鍵原料

B.低成本

C.降低批次差異

D.人源化原料更精準

二、應用

•三維細胞球體培養試驗

•適合用于三維細胞藥物篩檢平臺

三、樣本類(lèi)型

•腫瘤細胞系

四、試劑盒組分

五、使用步驟：

A、試劑制備

A 基質(zhì)膠：將A 基質(zhì)膠溶于 37℃水浴槽回溫 10分鐘， 確認*融解.

C 緩沖溶液(1X)制備： 使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無(wú)細胞培養液(例如：無(wú)血清 DMEM、 opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .

D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

Biozellen®3D 細胞培養基質(zhì)膠的制備

全部步驟需要在無(wú)菌環(huán)境內操作，操作步驟如下：

1. 將 24孔培養板放置于冰上預冷。

2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養基均勻混合，并與 0.5毫升 37℃ A 膠按照

1:1 等比例均勻混合，最終細胞密度105~107cells/mL。

注：請選擇適當的培養溶液與條件進(jìn)行試驗，貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養。

3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養板上， 膠體將于 5 分鐘內成膠。

注: 測試膠體是否成膠，可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進(jìn)行確認。

4.待膠體成膠后，添加 1 毫升冰的1X C 緩沖溶液，并蓋過(guò)步驟 3 的膠溶液，固定 15 分鐘。

5.待 15分鐘固定后，小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長(cháng)之培養基溶液。

6將含有細胞的膠于 37°C 二氧化碳培養箱內進(jìn)行7~14天的培養，并觀(guān)察細胞球體的形成，按正常培養基

更換頻率進(jìn)行更換操作。

C、溶膠與收集細胞球體準備程序

小心的將培養基吸取移除，并用 1X PBS 進(jìn)行清洗。

小心的將 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液，蓋過(guò)膠滴于室溫反應 5 分鐘。

溫和的用 1毫升移液管吸取，直到膠滴*溶解。

將含有細胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管，用1000 rpm的轉速離心 10分鐘，移除上清液體并收集細胞

球體做分析。

D、收集單顆細胞準備程序

在分離單細胞前，先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進(jìn)行操作

1. 添加 trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于 37°C 混合反應。

2. 用 1毫升移液管混合，直到細胞體*分解。

3. 待細胞球體*分解，加入 3 倍體積的 1X PBS，并用 1000 轉的轉速進(jìn)行離心 10分鐘，并移除上清

液體收集沉淀的單細胞做分析。

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