很多老師在設計科研實(shí)驗的時(shí)候都會(huì )很迷茫，到底用什么細胞好？越來(lái)越多的老師開(kāi)始傾向于原代細胞的科研實(shí)驗，在設計實(shí)驗中，原代細胞和細胞株到底該怎么選擇呢？

原代細胞的定義：

原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養。因此，較為嚴格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養，此時(shí)的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實(shí)際上，我們通常把第一代至第十代以?xún)鹊呐囵B細胞統稱(chēng)為原代細胞培養。

原代細胞因為可以模擬機體的功能，主要用于：生物醫藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究

下面我們整理了一些培養原代細胞的小知識：

細胞復蘇

原代細胞對解凍過(guò)程非常敏感，因此將小瓶置于37℃水浴鍋中，保持并輕輕旋轉直到內容物剛剛解凍是很重要的。然后應立即從水浴中取出小瓶，并轉移到無(wú)菌操作臺。確保您的培養瓶在解凍前已經(jīng)準備就緒，以便可以立即用于接種細胞，并置于培養箱中，使用cell systems的原代細胞時(shí)，復蘇的時(shí)候不建議離心，第二天換個(gè)液就可以。

細胞傳代

原代細胞有間隙抑制接觸不良反應，所以細胞不能到達100%的密度的時(shí)候傳代，一般*的建議觀(guān)察細胞的生長(cháng)周期，Cell Systems的原代細胞在細胞密度達到85%左右的時(shí)候傳代最佳，當生長(cháng)至100％匯合時(shí)，它就會(huì )衰老。記住，所有的原代細胞不是100％純，因此我們要盡量減少污染細胞的生長(cháng)。當細胞傳代時(shí)，使用低濃度的胰蛋白酶，也可以嘗試下cellsystems的整體消化套裝哦（品牌：cell systems，貨號：4Z0-800）并在顯微鏡下密切監測細胞。此外，記得在胰蛋白酶消化后*中和細胞中的胰酶，因為任何活性的胰蛋白酶都將損傷細胞。

細胞凍存

通常我們不推薦重新凍存原代細胞，因為這可以促進(jìn)細胞衰老和/或導致功能變化。原代細胞非常敏感，重新凍結可能導致細胞死亡或損傷。

與細胞系不同，原代細胞增殖有限，我們建議盡早使用原代細胞進(jìn)行實(shí)驗以防止遺傳漂移，如果你正在使用一個(gè)增殖困難的細胞類(lèi)型，你應該密切監測細胞形態(tài)，因為少量混雜的細胞（如成纖維細胞）可能隨著(zhù)時(shí)間的推移，大量生長(cháng)從而成為主要細胞。

正常的原代細胞培養，在無(wú)污染的情況下，建議培養基中不加抗體，抗體會(huì )影響細胞的某些基因變異從而導致實(shí)驗數據有差異，所以cell systems的細胞在分離提取時(shí)就考慮到這點(diǎn)，他們不會(huì )采用任何抗體去分離和純化的同時(shí)，通過(guò)酶消化或者離心洗滌的方法讓細胞達到95%以上的純度，這樣得到的實(shí)驗數據更為準確。