細胞為啥總是一言不合就抱團生長(cháng)？！

是細胞污染了還是正?，F象？

是消化不好了還是鋪板有問(wèn)題？

抱團細胞越來(lái)越多，怎么樣才能讓細胞分開(kāi)生長(cháng)？

請認真閱讀以下干貨，看看能否幫您答疑解惑！

細胞抱團一定代表細胞狀態(tài)不好嗎？

▲RAW264.7細胞-正常狀態(tài)

▲RAW264.7細胞-異常狀態(tài)

▲H9c2細胞-正常狀態(tài)

▲H9c2細胞-異常狀態(tài)

3、細胞抱團是因為細胞污染了嗎？一般細胞培養液清亮，就不是污染。如果是污染了的話(huà)，可以通過(guò)觀(guān)察培養液顏色，若污染，則很渾濁。

細胞為啥總是喜歡抱團？

• 細胞死亡釋放出DNA，纏繞其他細胞，形成黏性的細胞團（消化的過(guò)程可能過(guò)于粗暴，吹打太用力，消化太久，消化液太強或有毒性等）。

• 細胞離心速度過(guò)大或時(shí)間太長(cháng)。

• 消化不*的時(shí)候，細胞和細胞之間的連接沒(méi)有分開(kāi)；消化過(guò)度的時(shí)候，圓形的細胞容易聚堆，再分開(kāi)很困難！

• 狀態(tài)不好、老化的細胞，也可能會(huì )出現抱團生長(cháng)的情況（比如換液不及時(shí)、長(cháng)的太滿(mǎn)才傳代、污染等造成的細胞狀態(tài)差）。

• 傳代時(shí)沒(méi)有吹打均勻，細胞團多，培養時(shí)就會(huì )是一團一團的。

• 傳代后細胞鋪板不均勻。

• 有可能是雜細胞，或者死細胞。

• 細胞未消化開(kāi)。

• 非震蕩培養或細胞量過(guò)多的話(huà)就會(huì )成團。

如何避免細胞抱團？

• 用無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細胞。

• 對于貼壁非常牢固的細胞（如MDCK），為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，建議分多批多次消化，這樣才能最大限度地降低胰酶對細胞的損傷，保證細胞的狀態(tài)能夠*。

• 細胞生長(cháng)密度不要太高，70%－80％就好（細胞剛剛基本成單層細胞，沒(méi)有出現堆疊生長(cháng)），這樣細胞抱團的幾率就大大減少了。如果細胞已經(jīng)長(cháng)成集落，可先將細胞低密度傳代，第二天再消化傳代，這樣連續傳三次，細胞抱團就會(huì )越來(lái)越小，這樣幾代過(guò)后，再按照常規消化方法和時(shí)間能將細胞逐漸傳成單個(gè)的。

• 消化過(guò)程中最好不要使勁搖動(dòng)培養瓶，這樣細胞特別容易成屑樣脫落。細胞一旦脫落入懸液里就很難再將他吹打成單個(gè)（因為細胞沒(méi)有受力點(diǎn)了，所以細胞很難分散開(kāi)）。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開(kāi)，嚴格控制好消化程度。

• 消化過(guò)程需要使用槍頭輕輕吹打，切忌使勁拍培養瓶的側壁。拍瓶子想要將細胞拍散的力度對于細胞來(lái)說(shuō)相當于大地震，細胞本身是無(wú)法承受如此振蕩的。

細胞抱團了，要如何處理？