細胞培養常遇見(jiàn)問(wèn)題集錦第五期，小編繼續與大家探討細胞培養時(shí)遇到哪些讓人煩惱的問(wèn)題~

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問(wèn)：請教一下大家，準備從別的實(shí)驗室借一瓶細胞，20分鐘之內可以拿到自己的實(shí)驗室，運輸的時(shí)候可以培養瓶里充滿(mǎn)培養基，封口膜包緊，常溫放在泡沫盒里嗎？那拿到自己的實(shí)驗室后，在充滿(mǎn)培養基的情況下，倒掉一部分后，留10ml（25cm2皿）培養基繼續放培養箱培養就可以了對嗎？

答：可以，細胞沒(méi)那么脆弱。拿回來(lái)直接噴酒精扔進(jìn)去就可以了。

22、

▲問(wèn)：這個(gè)769p 腎癌細胞最近幾天細胞間隙有很多小黑點(diǎn)，是貼壁的，傳代也沒(méi)有用，是污染嗎？跟雙抗有關(guān)嗎？因為有些人不加雙抗養細胞，那主要還是考慮營(yíng)養不夠的原因嗎？

答：看著(zhù)很瘦，好像營(yíng)養匱乏。

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▲問(wèn)：請問(wèn)這個(gè)細胞是污染了嘛？那請問(wèn)同樣培養基同一盒槍頭只有一瓶污染了是怎么回事呢？那請問(wèn)菌混在氣溶膠中應該怎么滅菌呢？

答：這是酵母菌污染。菌的話(huà)可以通過(guò)紫外滅菌和過(guò)氧化氫熏蒸。

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▲問(wèn)：上兩圖是不是人胚肺成纖維細胞MRC-5細胞污染了？用pbs洗洗不掉，而且越來(lái)越多，用的培養基是細胞公司那里購買(mǎi)的適配*培養基，才是第3次傳代，越傳越差，用的是不含EDTA的胰酶，之前說(shuō)含EDTA的胰酶傳不了幾代細胞就不好了，但是不含EDTA的胰酶消化特別慢得7-8分鐘，時(shí)間短了吹不下來(lái)

答：好多死細胞，長(cháng)時(shí)間不換液，肯定會(huì )變黃，應該是細胞碎片，消化時(shí)間太長(cháng)了，最好不超過(guò)5分鐘，可以分次消化，已消化的先傳皿，然后再消化還在貼壁的。

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▲問(wèn)：這是什么污染嗎？

答：看不太清，有點(diǎn)像細胞碎片

▲問(wèn)：胃黏膜上皮細胞，是細胞碎片還是污染？

答：可以用三抗搶救一下。

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