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細胞培養常遇問(wèn)題集錦(六)
發(fā)布時(shí)間: 2021-12-01 點(diǎn)擊次數: 1129次26、
▲問(wèn):有時(shí)候細胞和細胞之間就會(huì )出現這種小黑點(diǎn),高倍鏡下看少數在原地打轉,但是培養液不渾濁。那其中不會(huì )動(dòng)的是細菌嗎?
答:原地打轉的可能為黑膠蟲(chóng),會(huì )動(dòng)的是細菌,細菌有鞭毛。黑膠蟲(chóng)是一種現象,身份可能是細菌,有鞭毛會(huì )游動(dòng)。
27、
問(wèn):想問(wèn)一下,已經(jīng)使用三抗以及抗支原體的藥物培養細胞一周,但還是有少量黑膠蟲(chóng),但細胞生長(cháng)狀態(tài)還好,這樣的話(huà)接下來(lái)還需要處理嘛?好像有一種有少量黑膠蟲(chóng)但不影響細胞狀態(tài)可以不做處理的說(shuō)法?
答:一周,黑膠蟲(chóng)數量減少,已經(jīng)見(jiàn)效了,但還是要繼續處理,因為黑膠蟲(chóng)和細胞有此消彼長(cháng)的特點(diǎn),細胞復蘇或剛傳代時(shí),因為此時(shí)細胞狀態(tài)差,所以特別容易爆發(fā)黑膠蟲(chóng),黑膠蟲(chóng)數量增多,當細胞復蘇率增強時(shí),黑膠蟲(chóng)數量會(huì )減少。
28、
問(wèn):話(huà)說(shuō)養細胞的時(shí)候,一直加雙抗,會(huì )對哪些實(shí)驗有影響呢?之前聽(tīng)說(shuō)做干擾的時(shí)候,要撤雙抗。
答:一般做功能學(xué)實(shí)驗,藥理學(xué),毒理學(xué),信號通路都要撤掉雙抗。
29、
問(wèn):Cho傳代接種密度0.4 e5,4天才長(cháng)到11e5,是怎么回事?DT從16.5變成20了。一直都用的一樣的培養基,是不是凍溶會(huì )影響?是cho細胞,搖瓶培養。
答:檢查一下?tīng)I養體系是不是不適合,如不是,那就考慮是胰酶消化這一步是不是有問(wèn)題。你這邊是把cho貼壁馴化成懸浮了。
30、
問(wèn):請問(wèn)怎么培養破骨細胞?怎么提取到培養的protocol?遇到一個(gè)情況,怎么消化也消化不下來(lái),想從源頭找一找,是什么原因?
答:破骨細胞的培養方法主要有:骨髓機械分離法,骨髓細胞誘導法,脾干細胞誘導法,血液?jiǎn)魏思毎T導法,小鼠RAW264.7細胞系誘導法及骨巨細胞瘤分離法。
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