THP-1細胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細胞白血病細胞系。它來(lái)自一位急性單核細胞白血病患者的血液，有分化為多種巨噬細胞的能力，是各領(lǐng)域研究常用的細胞系之一。                    

在偏酸性環(huán)境中，THP-1生長(cháng)更快，所以當培養基稍微變黃（呈橘紅色）時(shí)，是適合細胞生長(cháng)的，此時(shí)補液或半換液即可。（詳細操作見(jiàn)下文換液篇）

THP-1細胞密度低時(shí)，生長(cháng)較慢，培養密度維持在50萬(wàn)-100萬(wàn)細胞/毫升為宜；超過(guò)200萬(wàn)/毫升則需要傳代。

選擇品質(zhì)好的血清更有利于THP-1細胞生長(cháng)。

▲ THP-1生長(cháng)圖片

收到細胞后，放進(jìn)培養箱靜置2-4小時(shí)，之后將瓶中培養基全部離心（1200rpm或250g，3分鐘），去上清，用適量新鮮培養基重懸細胞，按比例接種到新培養瓶中。

收到細胞后，如果不復蘇，放進(jìn)-80℃冰箱暫存或放進(jìn)液氮長(cháng)期保存。如果復蘇，按照常規復蘇步驟操作（見(jiàn)下文復蘇篇）即可。

▲ 常溫THP-1細胞，收貨處理示意圖

培養基變黃時(shí)可補加適量（1~2mL）新鮮培養基，補加1-2次之后，用離心的方式全部換液，離心1200rpm （約250g）3分鐘。

以T25瓶子為例，瓶子里裝有5mL培養基。豎起瓶子靜置一段時(shí)間，待細胞沉底，小心吸出2.5mL的培養基，轉移到離心管，離心1200rpm （約250g）3分鐘，檢查有沒(méi)有沉淀，以免損失細胞；原瓶補充2.5mL新鮮培養基，離心管里若有細胞，則用新鮮培養基重懸后放回原瓶。

▲ 半換液操作示意圖

搖晃培養瓶，把細胞搖勻，均分到兩個(gè)瓶子里，每瓶再補充等量培養基。

離心后計數，按照40-50萬(wàn)細胞/mL的密度接種到T25瓶里，瓶中培養基量以5mL為宜。不方便計數時(shí)，按1:2比例傳代。

▲ 傳代時(shí)機

受到運輸影響，懸浮細胞會(huì )短暫性出現形態(tài)改變的現象，如偽足等。通過(guò)傳代培養，1周左右可以恢復正常。一些細胞在運輸途中死亡而產(chǎn)生碎片，通過(guò)傳代離心可以去除（見(jiàn)上文傳代篇）。

少量細胞貼壁屬于正常情況，將細胞懸液轉移至新瓶中即可。當貼壁細胞的比例高于20%，說(shuō)明細胞生長(cháng)環(huán)境有異常，需排查培養箱設置、培養基成分，以及培養器皿是否異常。

少量細胞聚團，呈葡萄串狀，屬于正?，F象，特別是細胞密度較低時(shí)，易出現這種情況。更換血清品牌或增大血清比例（不超過(guò)20%）有助于解決聚團問(wèn)題。不建議將聚團的細胞吹散，等待密度高時(shí)，會(huì )自己分散開(kāi)。

β-巰基乙醇是一種常用的培養補充劑，有抗氧化的作用，可減少氧化應激對THP-1細胞的影響。當細胞密度過(guò)大但需要維持時(shí)，可適當增加巰基乙醇的比例（不超過(guò)標準量的1.5倍）。

懸浮細胞會(huì )隨著(zhù)液體流動(dòng)，不容易聚焦，靜置5-10分鐘使細胞沉底，之后再輕輕放上顯微鏡觀(guān)察，將有助于聚焦和估算細胞密度。

▲ 嚴重聚團的THP-1細胞