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    為什么細胞會(huì )抱團?因為天氣冷了?

    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-09  點(diǎn)擊次數: 3465次

    是否總是遇到細胞抱團的現象?是否總是因為搞不清楚細胞抱團原因而困惑?是否總是因為難以將抱團細胞拯救回來(lái)而抓狂?童鞋們,我來(lái)拯救你們的細胞了,今天給大家從四個(gè)層面剖析細胞抱團的真實(shí)原因,快來(lái)圍觀(guān)吧!


    一、細胞本身生長(cháng)特性有抱團傾向

    有些細胞本身有抱團生長(cháng)的特性,給大家看五種喜歡抱團的細胞類(lèi)型:


    細胞類(lèi)型①:NCI-H716 人結直腸腺癌細胞

    形態(tài):淋巴母細胞樣

    生長(cháng)特性:懸浮生長(cháng)


    圖片
    細胞喜歡在懸浮液中呈葡萄狀聚集,抱團細胞粒粒飽滿(mǎn)


    細胞類(lèi)型②:Caco-2人結直腸腺癌細胞

    形態(tài):上皮樣

    生長(cháng)特性:貼壁生長(cháng)


    圖片
    此細胞喜歡貼壁成片分布,呈融合狀,細胞個(gè)頭大小不勻


    細胞類(lèi)型③:CaLu-3 人肺癌細胞

    形態(tài):上皮樣

    生長(cháng)特性:貼壁生長(cháng)


    圖片
    此細胞也是喜歡聚集分布,呈片狀,片狀之間有空白



    細胞類(lèi)型④:SH-SY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞

    形態(tài):上皮樣

    生長(cháng)特性:貼壁和懸浮生長(cháng)


    圖片
    此細胞貼壁居多,有輕微的抱團傾向



    細胞類(lèi)型⑤:BT-474人乳腺癌細胞

    形態(tài):上皮樣

    生長(cháng)特性:貼壁、片狀生長(cháng)


    圖片
    此細胞也是喜歡片狀生長(cháng)



    除了有喜歡抱團的細胞類(lèi)型,也會(huì )有喜歡分散生長(cháng)的細胞類(lèi)型,來(lái)給大家展示二種細胞類(lèi)型:

    細胞類(lèi)型①:MSC(人源脂肪來(lái)源)

    形態(tài):成纖維樣

    生長(cháng)特性:貼壁生長(cháng)


    圖片
    此細胞成纖維樣,均勻分布,平鋪皿底,不留空隙



    細胞類(lèi)型②:HEF小兒包皮成纖維細胞(人源脂肪來(lái)源)

    形態(tài):成纖維樣

    生長(cháng)特性:貼壁生長(cháng)


    圖片
    此細胞也是喜歡分散生長(cháng),均勻分布



    大多數上皮樣或神經(jīng)母細胞瘤樣的細胞更喜歡抱團生長(cháng),而大多數成纖維樣細胞更喜歡分散、均勻生長(cháng)。


    又有一個(gè)問(wèn)題來(lái)了,那就是我們如何區分細胞抱團正不正常。

    這里開(kāi)始劃重點(diǎn)了,大家看好了:

    1. 如果細胞本身是分散生長(cháng),結果抱團嚴重,說(shuō)明細胞“生病"了,我們要給細胞“診治"。

    2. 如果本身生長(cháng)特性就有抱團的細胞,如何判斷它的抱團正不正常呢?


    這里小編告訴您,細胞哪怕是抱團了,也是“粒粒飽滿(mǎn),棱角分明"的,回頭看看上面抱團的細胞,是不是細胞之間有明確的“分界線(xiàn)",這說(shuō)明它們抱在一起很健康;而異常的細胞抱團,你是觀(guān)察不到細胞之間的“界限"的,細胞形態(tài)也不規則,邊緣模糊,遠遠看去,抱團的細胞像“一團漿糊"。



    二、細胞老化更容易抱團 


    細胞類(lèi)型:MSC(人源臍帶來(lái)源第6代)

    形態(tài):成纖維樣

    生長(cháng)特性:貼壁生長(cháng)

    圖片
    如圖所示:

    人臍帶來(lái)源第6代的間充質(zhì)干細胞,白色箭頭指示的是發(fā)生細胞老化的MSC細胞,β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性,染上藍色。由圖片可以看出老化細胞體積增大、細胞扁平。白圈圈起來(lái)的是聚團細胞,老化細胞容易聚團生長(cháng),狀態(tài)變差。


    三、血清批間差可能導致細胞抱團 

    那么問(wèn)題來(lái)了,血清為何有批間差?

    因為血清來(lái)源于動(dòng)物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血動(dòng)物的年齡、生理條件和營(yíng)養條件而異。每個(gè)批號的組分百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。

    圖片

    H9c2 低密度正常形態(tài)

    舊批次血清


    圖片

    H9c2 低密度抱團形態(tài)

    新批次血清


    圖片

    H9c2高密度異常形態(tài)

    舊批次血清


    圖片

    H9c2高密度異常形態(tài)

    新批次血清


    血清批間差可能會(huì )導致細胞抱團。

    如圖所示,大鼠心肌細胞在更換了新批次的血清之后,隨著(zhù)傳代次數的增加,抱團明顯。正常低密度下,細胞舒展開(kāi)來(lái),均勻分散,但異常的的細胞會(huì )呈現聚集生長(cháng)狀態(tài),高密度下正常細胞像鋪路石一樣均勻鋪滿(mǎn),不留空隙,但高密度下異常的細胞,形態(tài)模糊,難以辨認,像四川九寨溝一樣的溝壑重生。


    四、胰酶消化不當容易導致細胞抱團 

    圖片

    HEK293細胞


    導致細胞抱團的第一種情況是胰酶消化操作不當。

    如果您經(jīng)常遇到傳代的細胞貼壁后老是貼壁不勻,成片分布,抱團生長(cháng),來(lái)看看你有沒(méi)有注意這幾個(gè)細節噢。

    1、如圖所示,HEK 293因消化過(guò)度或吹打過(guò)猛導致細胞受傷嚴重,破損的細胞碎片容易粘連抱團;

    2、消化時(shí)細胞融合率太高,成片脫落,將不容易被吹散,容易抱團,我們建議細胞融合率達到80%傳代為佳;

    3、吹打力度不足,難以將成片脫落的細胞吹散,容易抱團。



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