www.zgyzbh.com-国产精品乱码一区二区三区,乱色老熟女一区二区三区,亚洲小说春色综合另类,S货C货大声点叫

銷(xiāo)售熱線(xiàn)

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > CAT活性的相-抽提分析法

    CAT活性的相-抽提分析法

    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-16  點(diǎn)擊次數: 1049次

    材料與儀器

    轉染細胞
    氯霉素 Tris·Cl TMPD 二甲苯
    離心機 離心管 培養箱

    步驟

    一、來(lái)源于哺乳動(dòng)物細胞

    1.  按“CAT活性的層析分析法"中的步驟1~5的凍融法,制備哺乳動(dòng)物細胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制細胞方法來(lái)收集細胞,則將原位裂解法的步驟1至4用以下的步驟2至4代替。

     
    2.  室溫下,300 g 離心5 min,棄去上清。每107細胞加入1 ml 低滲緩沖液,離心,棄上清。然后每107細胞加Triton裂解液200 μl。

    二、來(lái)源于植物原生質(zhì)體
     
    1.  室溫下,2 000~4 000 g 離心5 min,將植物原生質(zhì)體細胞收集于1.5 ml 的微量離心管中,棄去上清。

    2.  往細胞沉淀加50 μl 低滲緩沖液,在旋渦混合器上劇烈振蕩,將離心管置于-70℃ 15 min以上,或置于干冰/乙醇浴中5 min 以?xún)鼋Y樣品。融解樣品,在室溫下13 000  g 離心2 min,將上清移入一個(gè)干凈管中。

    3.  對于分析50 μl 細胞提取液,配置如下CAT分析混合液
    20 μl  0.01 μCi/μl [3H]氯霉素
    5 μl  5 mg/ml 丁酰輔(酶)A
    5 μl  2 mol/l Tris·Cl,pH8.0
    20 μl  H2O
     
    4.  對每組分析,將50 μl CAT分析混合液加入50 μl 細胞提取液中。37℃溫育30~90 min。
     
    5.  用200 μl 2:1的TMPD/二甲苯劇烈報蕩提取乙?;穆让顾?,離心并移出上層液相至一只閃爍瓶中。

    6.  樣品中加3~5 ml 閃爍液,計數測定CAT的活性。


    同實(shí)驗其他方法

    CAT活性的層析分析法

    1.  100 mm 培養皿中的轉染了CAT表達質(zhì)粒的貼壁細胞,用PBS洗兩次,每次5 ml每培養皿加入1 ml TEN溶液。將細胞置于冰浴5 min。   2.  用橡膠

    原位裂解細胞的CAT分析法

    1.  60 mm 培養皿中轉染了CAT表達質(zhì)粒的細胞,用2 ml PBS洗1次。每培養皿加入2 ml 低滲緩沖液,在室溫下溫育2~5 min。 2.  吸去低滲緩沖液,加入400 μl T

    人生長(cháng)激素的放射免疫分析法

    1.  取轉染了hGH表達質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物細胞的培養液100~500 μl。 2.  加100 μl 培養液或標準品至12 mm×75 mm 圓底試管中。加入100 μl 125I-

    以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉染、大規模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領(lǐng)域客戶(hù),提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn),包括培養間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細胞培養規模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。


產(chǎn)品中心 Products
儋州市| 正镶白旗| 上蔡县| 曲麻莱县| 浮山县| 辽阳市| 当涂县| 牡丹江市| 明星| 辽阳市| 光泽县| 新安县| 三台县| 盐边县| 鲜城| 靖远县| 游戏| 独山县| 商城县| 舒城县| 南和县| 天等县| 陵水| 胶南市| 武山县| 桐城市| 巴南区| 扬州市| 九龙城区| 卢湾区| 崇义县| 桂林市| 定西市| 张家川| 江陵县| 余干县| 磐石市| 上思县| 景泰县| 大足县| 赞皇县|