常聽(tīng)到一些新手同學(xué)養細胞，自己總是經(jīng)歷失望-絕望-希望的過(guò)程，現在為了方便一些新手同學(xué)養好細胞。把幾點(diǎn)注意問(wèn)題跟大家分享一下，希望能夠對新手們稍有幫助：

1. 細胞不要過(guò)度消化，有些貼壁不牢的如293T，加入胰酶在臺子里晃晃就可以了，不用放到溫箱中；

2. 傳代時(shí)，細胞分的稀了或者分的不均勻，形成單細胞的克隆群，細胞就會(huì )長(cháng)成密密麻麻的一群，如293T會(huì )成為小方塊狀，而不是正常的不規則形狀，這時(shí)候，即使沒(méi)有長(cháng)滿(mǎn)盤(pán)，也應該消化重新鋪板。

3. 貼壁細胞的上清看起來(lái)清亮、顏色正常時(shí)，即使在鏡下檢測有些懸浮物，一般不是污染而是死細胞，尤其是復蘇的細胞，由于有死細胞，會(huì )有很多懸浮物。（以前很多同學(xué)看到有懸浮物就以為污染了，還倒掉了好不容易借來(lái)復蘇的一盤(pán)細胞）。污染了會(huì )看到明顯的懸濁液。

4. 不能讓培養基變色，稍微變黃就應該傳代，如果沒(méi)有長(cháng)滿(mǎn)，可以換液，但是如果變黃了，細胞就會(huì )皺縮，或者死亡，大批量的浮起來(lái)。這時(shí)候就別挽救了。

5. 關(guān)于污染，很多新手剛開(kāi)始做的時(shí)候，無(wú)論怎么小心，還是會(huì )莫名其妙的污染。這個(gè)咱們說(shuō)是人生必經(jīng)階段。到現在我也還是很贊同這個(gè)理論。所以，絕望后別放棄才會(huì )有希望！

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