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    倒置顯微鏡的使用

    發(fā)布時(shí)間: 2022-12-05  點(diǎn)擊次數: 695次

    原理

    將培養物放在顯微鏡的載物臺上,打開(kāi)電源,選擇合適的鏡頭,聚焦于標本。如果必要的話(huà),將聚光器和相差環(huán)調節在中心。

    材料與儀器

    倒置顯微鏡 擦鏡紙

    步驟

    1. 確保顯微鏡(配有相差10×、20× 或40× 的物鏡及聚光器和合適的相差環(huán))潔凈(用 70 % 乙醇擦拭載物臺。如果有必要,用擦鏡紙清潔物鏡)。

      2. 打開(kāi)電源,將燈光強度從最-低開(kāi)始調至合適的強度,而不是直接打到強光。

      3. 檢查光源與聚光器的銜接:

      (a)將一張染色切片、培養瓶或培養皿放在載物臺上;

      (b)關(guān)閉視場(chǎng)光圈;

      (c)聚焦在可變光闌上;

      (d)將可變光闌成像調整到視野的中央。

      4. 將相差環(huán)調至中央:

      (a)如果顯微鏡配有相差望遠鏡,將之插入標準目鏡位置,然后聚焦于相差環(huán),檢査聚光器環(huán)(黑色背景中的白環(huán))是否與物鏡環(huán)(白色背景中的黑環(huán))同軸;

      (b)如果沒(méi)有相差望遠鏡,則將染色的標本換為沒(méi)有染色的培養物(活的或固定的培養物),重新聚焦,調整相差環(huán),直到獲得最-優(yōu)對比。

      5. 觀(guān)察細胞。10× 相差物鏡作為常規觀(guān)察已足夠,4× 相差物鏡不能提供足夠的細節資料,而高于 10× 的放大倍數則限制了觀(guān)察區域。

      (a)注意生長(cháng)期(例如,稀疏、亞匯合、匯合、致密);

      (b)注意細胞狀態(tài)(例如,清亮、透明或有顆粒、有空泡等)。

      6. 檢査培養基的清亮程度(例如,無(wú)碎片、漂浮的顆粒、污染跡象等),根據需要選擇一個(gè)放大倍數更高的物鏡。

      7. 記錄觀(guān)察的結果。

      8. 旋低變阻器(把燈光調暗),關(guān)掉電源。

      9. 將培養液放回孵箱,或放在超凈臺上進(jìn)行無(wú)菌操作。


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